产品货号:
JN5058
中文名称:
2×Taq MasterMix(PAGE快速上样)
英文名称:
2×Taq PCR Master Mix for PAGE(Quick Load)
产品规格:
5mL|25mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是由Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、优化的反应缓冲液以及PCR增强剂整合后研发而成的预混试剂,具有极高的稳定性,绝大部分PCR扩增能够一次成功,同时复杂模板也能得到有效扩增。扩增产物3’端带有一个”A”碱基,可直接用于T/A克隆。2×Taq MasterMix(PAGE快速上样)经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳。2×Taq MasterMix(PAGE快速上样)主要适用于常规PCR反应及较短DNA片段的PCR克隆等试验,专用于聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。
- 常规PCR反应;
- 平端PCR产物加A;
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。
- 稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
- 快捷:PCR反应所需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
组分 | 5mL | 25mL |
2×Taq MasterMix(PAGE快速上样) | 5×1mL | 25×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
- 使用本制品扩增得到的PCR产物具有3'端”A”突出,可直接克隆与T载体中;
- PCR反应液请在冰上配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。
- 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
- 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足。循环数过多,扩增量增加,但突变率会增加,并造成非特异性扩增。
- 根据引物Tm值设置合适的退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增。退火温度过高,可能扩增不到目的条带。
- 常用反应体系
注:Mg2+终浓度为2mM。成分 用量 2×Taq MasterMix 25μL 上游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 下游引物 0.2~1.0μM(终浓度) 模板 1~50ng(质粒)
10ng~1μg(基因组)ddH2O 至50μL - 推荐PCR反应程序
- 当扩增片段<3K:
循环数 温度 时间 1 94℃ 90s 30 94℃ 20s 50~60℃ 20s 72℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温 - 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp):
循环数 温度 时间 1 94℃ 5min 30 94℃ 5s 68℃ 1kb/60s 1 72℃ 5min 1 4℃ 保温
- 当扩增片段<3K:
在50μL扩增体系中,分别以人基因组DNA为模板,对特定基因片段(1000bp)进行扩增。
泳道1,2:2×Taq MasterMix(PAGE快速上样);
泳道3,4:A公司的Taq预混液;
泳道M:DNA Ladder 2000。
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